全文总字数：3864字
1. 毕业设计（论文）的内容和要求
（1）论文内容本课题利用番茄来源的UGTSL2结合蔗糖合成酶，催化甜菊苷生成莱鲍迪苷E。
构建质粒pRSFDuet-UGTSL2-StSUS1，导入大肠杆菌，通过5L发酵罐获取目的菌株，并优化发酵条件。
获取粗酶并建立5L反应体系催化合成莱鲍迪苷E，并通过树脂柱纯化及结晶的手段获取高纯度莱鲍迪苷E。
2. 实验内容和要求
实验内容及要求：（1）实验内容：采用基因工程手段，以大肠杆菌作为宿主，对UGTSL2及StSUS1进行共表达。
通过5L发酵罐获取目的菌株，研究发酵条件的优化。
获取粗酶并建立5L反应体系催化合成莱鲍迪苷E，研究树脂柱纯化及结晶条件的优化，最终获取高纯度莱鲍迪苷E。
3. 参考文献
[1] 韩仁娇, 蓝航莲, 王彩云, 侯占群. 天然甜味剂甜菊糖苷及其在食品中的应用[J]. 食品与发酵工业， 2021 , (05-23) :1-9.
[2] Allen A L, Mcgeary J E, Hayes J E. Rebaudioside A and Rebaudioside D bitterness do not covary with Acesulfame K bitterness or polymorphisms in TAS2R9 and TAS2R31[J]. Food Chemistry, 2013, 6(3):103-124.
[3] Chen L, Sun P, Zhou F, et al. Synthesis of rebaudioside D, using glycosyltransferase UGTSL2 and in situ UDP-glucose regeneration[J]. Food Chemistry, 2018, 259(SEP.1):286-297.
4. 毕业设计（论文）计划
进度安排：第1-2周：广泛查阅文献，对课题方向有一定了解并设计实验方案。
第3-4周：熟悉实验室仪器设备的实验，掌握了解相关实验原理及实验基本操作。
第5-6周：质粒的转化，菌种的保存。
