常见土壤脲酶活性测定方法的纯酶验证任务书

 2022-04-27 08:04

1. 1. 毕业设计（论文）的内容、要求、设计方案、规划等

研究目的：以脲酶纯酶为对象，解析常见脲酶活性测定方法的差异，遴选出更为简单、准确的土壤脲酶活性测定方法。

一、文献综述（重点）

认真阅读指定文献并查阅其他相关文献，按照以下方面撰写文献综述：

（1）土壤脲酶活性测定的浸提剂；

（2）土壤脲酶活性测定的抑制剂；

（3）土壤脲酶活性测定的对照处理的设置；

（4）本研究的思路、研究内容和方法。

二、研究内容与方案拟定（重点）

（1）脲酶纯酶样品。

（2）分别按照无甲苯法，甲苯法、关松荫方法测定脲酶纯酶活性（可联系卞玥）。

（3）确定脲酶活性测定的培养温度：xx℃。

（4）每个处理重复3次。

（5）写出实验过程中用到的试剂配制方法。

三、实验数据采集与处理

（1）实验过程应有详细纸质记录，包括试剂选择、配置，测定结果与存在问题等。

（2）每次测定应有重复（3次以上），测定值以平均值标准差表示。

（3）处理间的差异采用方差分析与多重比较进行解析。

四、结果分析

比较不同方法，特别是浸提剂、抑制剂和不同对照处理设置差异对脲酶活性测定结果的影响，确定简单、准确的测定方法。

五、讨论与结论

（1）紧密结合研究目的，讨论自己的数据变化说明了什么问题，变化的原因是什么；

（2）比较自己实验结果与已有相关文献的差异：一致还是不同？如果不同，分析可能存在的原因。

（3）凝练实验结论。

六、致谢

对直接指导和参与研究的老师、同学、父母、朋友等表示诚挚谢意！

七、参考文献

按照南林学报文献著录格式，阅读和引用以下参考文献

[1] Tabatabai M A., Bremner, J.M.etal, Assay of urease activity in soil[J].Soil Biol.Biochem.1972(4):479~487.

[2] 关松荫.土壤酶及其研究法[M]. 北京:中国农业出版社.1986.294~312.

[3] Kandeler,E.and H.Gerber, 1988.Short-term assay of soil urease activity using colorimetric determination of ammonium [J]. Biol. Fert. Soils, 6: 68~72.

[4] Blakeley R Let al. Nutritional Biochemistry and Physiology [J]. Biochemistry, 1969( 8):1984~1990.

[5] 薛泰麟,阂九康等.从土壤脲酶性质的角度探讨尿素合理施用的途径[J].中国农业科学，1991, 24(4):61~68.

[6] 汪远品，何腾兵.贵州主要耕作土壤的脉酶活性研究[J].热带亚热带土壤科学,1994,3(4):226~232.

[7] 江育璋,宋恩瀚等.土壤脲酶特性及其对尿素施用的影响[J].西南农学院学报,1984,2,15~21.

[8] 丰骁,段建平,蒲小鹏，邹雨. 土壤脲酶活性两种测定方法的比较[J].草原与草坪,2008(2):70~72.

[9] 张玉兰,陈利军.土壤芳基硫酸酯酶及其活性和农业措施影响[J].土壤通报,2006(04):33~46.

[10] 郑瑾，边文耀. 应用二氧化硫配套试剂测定工作场所空气中二氧化硫[J].疾病监测与控制,2012(3):170~171.

[11] 和文祥,蒋新,余贵芬,卞永荣.杀虫双对土壤脲酶影响的研究[J].土壤与环境,2002(01):506~509.

[12] 和文祥,朱铭莪,陕西土壤脲酶热力学特征的研究[J].土壤学报,2007,44(6):1043~1048.

[13] 和文祥,朱铭莪,张一平.汞镉对土壤脲酶活性影响的研究[J]Ⅰ.尿素浓度应用.生态学报,2002,13(2):1054~1060.

八、附录

列出文献综述、试验相关的参考资料、图片、程序等附属资料。数据直接相关资料须在正文中直接反映。

九、参考文献

除提供的文献之外，请自己查阅相关文献以较好完成文献综述部分。

实验方案内容与思路

方法及要点描述

目的

湿地沉积物脲酶活性

方法

编号

要点描述

崇明

洪泽

伊犁

I 无甲苯法

1

1 mol/L KCl和0.01mol/L的HCl混合液

明确HCl、Ag2SO4混合液是否可以有效抑制尿素分解或脲酶活性，以及不同KCl浓度的差异。

平均值标准差

2

1 mol/L KCl

3

2.5 mol Ll-1KCl和10-4 mol L-1Ag2SO4混合液

4

2.5 mol Ll-1KCl

5

2 mol/L KCl

6

按照编号1、3、5步骤进行，加相同试剂，相同步骤。把培养过的作为处理，不培养的用作对照。（之前方法中的对照失效）

比较不同对照方法的差异。

II 甲苯法

(TABATABAI and BREMNER， 1972)

7

按照标准方法步骤进行

比较不同对照方法的差异。

8

按照编号7步骤进行，所有加相同试剂，相同步骤，培养的作为处理，不培养的用作对照。（之前方法中的对照失效）

III甲苯法

（关松荫，1986）

9

按照标准方法步骤操作

比较不同对照方法的差异。

10

按照编号9步骤进行，所有加相同试剂，相同步骤，培养的作为处理，不培养的用作对照。（之前方法中的对照失效）

2. 参考文献（不低于12篇）

[1] Tabatabai M A., Bremner, J.M.etal, Assay of urease activity in soil[J].Soil Biol.Biochem.1972(4):479~487.

[2] 关松荫.土壤酶及其研究法[M]. 北京:中国农业出版社.1986.294~312.

[3] Kandeler,E.and H.Gerber, 1988.Short-term assay of soil urease activity using colorimetric determination of ammonium [J]. Biol. Fert. Soils, 6: 68~72.

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