全文总字数：3755字
1. 毕业设计（论文）的内容和要求
1．文献查阅掌握文献查阅的一般方法，学会使用计算机在中国期刊网，维普数据库，超星数字图书馆，Elsevier电子期刊，Springer Link全文电子期刊，Web of Science，pubmed等检索资源上查阅关于大肠杆菌载体构建、蛋白质基因表达及酶活检测的相关文献。
2.文献阅读及综述阅读与课题相关的外文及中文文献，了解国内外的研究动态，撰写文献综述。
3.明确实验任务，拟定实验方案根据所查阅文献的内容，确定实验内容及方案，拟定科学可行的研究计划。
2. 实验内容和要求
1.实验内容（1）通过PCR技术，扩增获得编码右旋糖酐蔗糖酶的基因；（2）提取pTrc99a载体质粒，对载体进行双酶切，获得酶切后的载体；（3）将目的基因与载体通过一步克隆相连，转化至DH5α感受态细胞中。
（4）提取转化后感受态中的质粒，再将其导入表达细胞BL21感受态中。
（5）50mL LB摇瓶37℃下培养，当OD600达到0.8左右，加入0.1mmol/L的IPTG，20℃培养20h。
3. 参考文献
[1]Yan Minghui,Wang Bing-Hua,Xu Xiaofen,Chang Peng,Hang Feng,Wu Zhengjun,You Chunping,Liu Zhenmin. Molecular and Functional Study of a Branching Sucrase-Like Glucansucrase Reveals an Evolutionary Intermediate between Two Subfamilies of the GH70 Enzymes.[J]. Applied and environmental microbiology,2018,84(9).
[2]Yoon Sung Ho,Kim Seong Keun,Kim Jihyun F. Secretory production of recombinant proteins in Escherichia coli.[J]. Recent patents on biotechnology,2010,4(1).
[3]Claire Moulis,Isabelle Andr,Magali Remaud-Simeon. GH13 amylosucrases and GH70 branching sucrases, atypical enzymes in their respective families[J]. Cellular and Molecular Life Sciences,2016,73(14).
4. 毕业设计（论文）计划
2020.11.30-2020.12.31 布置毕业论文任务2021.1.1-2021.1.23 查阅文献，书写开题报告, 建立实验条件2021.3.1-2021.4.20 构建右旋糖酐蔗糖酶表达载体2021.4.21-2021.4.30 中期检查2021.5.1-2015.5.30 右旋糖酐蔗糖酶的表达及其检测2021.5.31-2015.6.7 论文书写
