1. 1. 毕业设计（论文）的内容、要求、设计方案、规划等
TP53（p53的编码基因）是一个原癌基因（proto-oncogene），被广泛认为是一个肿瘤抑制基因，其表达产物为分子量53KD的基因调节蛋白-p53。p53是细胞中最重要的肿瘤抑制剂，被誉为基因组的守护者。p53在正常细胞中表达量极低，但是当细胞受到低氧、紫外照射、化合物刺激等反应后表达量快速急剧增加并被激活，由于含有一段序列专一性DNA转录结合序列，作为转录因子，p53可调节大量靶基因的表达，从而影响细胞周期阻滞、凋亡、分化、静息、DNA损伤、血管生成和转移的抑制以及其他功能。
研究表明，野生型p53蛋白的175、193及280三个位点氨基酸若发生突变，会严重影响其与BcI-2蛋白的结合，而BcI-2蛋白能够阻止细胞色素c从线粒体释放到细胞质，从而抑制了细胞凋亡。本课题前期已成功分离纯化野生型p53蛋白，在此基础上利用分子生物学中的定点突变技术，设计3对携带突变位点的引物，通过PCR以实现在野生型p53中引入突变碱基，进而改变175、193与280位氨基酸，并利用免疫沉淀检测突变后的p53蛋白。
根据实习要求，在实验过程中掌握分子克隆中常用的技术，如PCR、体外构建重无性繁殖体系、利用融合标签分离纯化目的蛋白、SDS-PAGE及免疫沉淀（Immunoprecipitation）等技术。实验数据的采集与处理，结果分析和结论图表和附表均按照相关规定进行。
2. 参考文献（不低于12篇）
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