不同漆酶的最适反应底物及反应体系研究任务书

 2022-09-26 02:09

1. 1. 毕业设计(论文)的内容、要求、设计方案、规划等

前言:

漆酶是一种多铜过氧化酶。近年来,人们发现它在造纸、染料、废水处理等工业上有着广阔的应用前景,因而对它的研究越来越备受关注。目前有关漆酶的研究论文很多,但主要是围绕如何提高漆酶的酶活、增强漆酶的稳定性而展开的。而漆酶酶活是否提高,漆酶稳定性是否增强都要通过对酶活的测定来确定。测定漆酶活力是评价漆酶性能以及保证生产中漆酶稳定性的常用方法。漆酶酶活的测定方法很多,但到目前为止还没一种标准的、统一的酶活测定方法,这也许是由于漆酶的来源很多(植物,细菌,昆虫,真菌),而不同来源的漆酶与底物反应的亲和力是不一样的,即使是同一来源的漆酶,反应的底物不同,反应的亲和力也不同,测得的酶活数值也不同。另外,反应条件如温度、酸度等对酶活的测定结果也有很大的影响。如红栓菌漆酶与邻联苯甲胺反应:当pH为5.0时测得的酶活约为pH等于5.8时的17%;当反应温度为70℃时,反应速率仅为30℃时的48.2%。从文献上看,目前漆酶酶活的测定大多数是在常温下进行(以紫丁香醛连氮为底物时,大多数在30℃条件下测定),而酸度却变化较大,基本上在3.0~7.0的范围内变动。

本课题组重组高产漆酶的菌株的漆酶基因分别克隆自Coriolus versicolorTrametes versicolor。与大多数的漆酶一样,漆酶酶活的测定只用一种方法,与用其它方法测得的酶活结果并未作过对照,因而就造成了不同漆酶酶活比较的巨大不便。在我们的前期工作中,Coriolus versicolor和Trametes versicolor漆酶酶活的测定都是采用ABTS为反应底物,在pH为5.0的条件下测定,酶活单位定义为单位时间内生成1 μmolL-1产物所需酶量。

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2. 参考文献(不低于12篇)

[1] 何为, 詹怀宇, 王习文. 一种改进的漆酶酶活检测方法[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2003, 31(12): 46~49.

[2] 胡平平, 付时雨, 李光日. 贝壳状革耳菌漆酶酶活测定方法分析[J]. 广州化学, 2001, 26(4): 22~28. 

[3] 秦小琼等. 红栓菌胞外漆酶的诱导、纯化及特性研究[J]. 微生物学报, 1996 , 36 (3) : 360~366.

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