1. 毕业设计（论文）的内容和要求
将里氏木霉的内切-1,4-β-D-葡聚糖酶II基因克隆至E. coli中，并提出质粒送往测序，并clustalx比对。
2. 实验内容和要求
1.1里氏木霉的活化培养 1.2里氏木霉菌体的分离 1.3里氏木霉总DNA的提取（Ctab法提取真菌DNA，并琼脂糖凝胶电泳检测） 1.4pcr扩增特定片段基因（由于该基因中有一个内含子，需要先用两次小片段扩增，然后第三次扩增将其连接获得完整的基因片段，并琼脂糖电泳验证） 1.5将特定的片段切胶回收 1.6将特定的片段转移至质粒中 1.7将质粒导入大肠杆菌中，转化大肠杆菌 1.8提出质粒并单酶切验证1.9送往测序并clustalx比对。
3. 参考文献
余晓斌, 具润漠. 里氏木霉液体发酵法生产纤维素酶[J]. 食品与发酵工业, 1998, 24(1): 20-25. 吴发红, 黄东益, 黄小龙, 等. 几种真菌 DNA 提取方法的比较[J]. 中国农学通报, 2009, 25(8): 62-64. 江洁, 杜连祥, 路福平, 等. 基因工程菌里氏木霉染色体 DNA 的提取方法[J]. 生物技术, 2004, 14(2): 24-26. 乔宇, 毛爱军, 何永志, 等. 里氏木霉内切-β-葡聚糖酶 Ⅱ 基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究[J]. 菌物学报, 2004, 23(3): 388-396. 张梁, 洪剑辉, 石贵阳. 里氏木霉 bgl1 基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达[J]. 酿酒科技, 2006 (9): 17-20. 汤新, 刘刚, 田生礼, 等. 里氏木雷内切葡萄糖苷酶挪在毕赤酵母中的表达[J]. 微生物学通报, 2005, 32(6).
4. 毕业设计（论文）计划
2.23-2.28里氏木霉的活化培养 2.28-3.3里氏木霉菌体的分离 3.3-3.20里氏木霉总DNA的提取 3.21-3.25pcr扩增特定片段基因 3.25-3.28将特定的片段切胶回收 3.28-3.30将特定的片段转移至质粒中 3.30-4.5将质粒导入大肠杆菌中，转化大肠杆菌 4.5-4.15提出转化的大肠杆菌质粒4.15-4.25送往华大基因测序并进行clustalx比对。
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