重组Tau蛋白及片段的原核表达与纯化研究任务书

 2021-08-20 10:08

1. 毕业设计(论文)主要内容:

微管系统是神经细胞骨架成分,可参与多种细胞功能。微管由微管蛋白及微管相关蛋白组成,Tau蛋白是含量最高的微管相关蛋白。正常脑中Tau蛋白的细胞功能是与微管蛋白结合促进其聚合形成微管;与形成的微管结合,维持微管稳定性,降低微管蛋白分子的解离,并诱导微管成束。Tau蛋白基因位于17染色体长臂。正常人中由于Tau蛋白mRNA剪辑方式不同,可表达出6种同功异构体。Tau蛋白为含磷酸基蛋白,正常成熟脑中Tau蛋白分子含2~3个磷酸基。而阿尔茨海默症(老年痴呆症)患者脑的Tau蛋白则异常过度磷酸化,每分子Tau蛋白可含5~9个磷酸基,并丧失正常生物功能。

毕业设计的主要目标是基于优化和合成的tau蛋白序列,构建片段突变体,在大肠杆菌中进行表达,并对其表达温度,诱导时间进行优化,再利用亲和层析方式进行纯化,从而得到大量的纯化tau蛋白,进行下一步的体外功能测试。

2. 毕业设计(论文)主要任务及要求

1、查阅不少于15篇的相关资料,其中英文文献不少于2篇,完成开题报告。

2、构建Tau 蛋白的片段突变体。

3、完成全序列Tau蛋白及其片段突变体的表达研究。

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3. 毕业设计(论文)完成任务的计划与安排

教师选题申报截止日期:2015-12-30

学生选题截止日期:2016-01-15

所在学院开题报告截止日期:2016-03-13

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4. 主要参考文献

[1] S Barghorn,J Biernat,E Mandelkow;Purification of Recombinant Tau Protein and Preparation of Alzheimer-Paired Helical Filaments In Vitro;Humana Press, 2005, 299:35-51

[2] 梁燕, 王海萍, 冯利杰,等. 人tau融合蛋白的原核表达及纯化[J]. 安徽医科大学学报, 2007, 42(04): 367-370.

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