斑马鱼骨骼肌组织糖水平变化对束丝藻毒素的响应任务书

 2021-08-25 11:08

1. 毕业设计(论文)主要内容:

本文以水环境污染产生的次生代谢产物水华束丝藻及其分泌的束丝藻毒素为实验材料,以斑马鱼为受试动物,以骨骼肌为关注对象,通过腹腔注射或其他方式进行毒素处理,在毒素处理后的一段时间内的不同时间点,对斑马鱼肌肉组织的糖代谢变化进行研究,旨在探索斑马鱼骨骼肌糖水平及其代谢酶活性变化等相关生理生化指标对该神经毒素致毒的响应,拟揭示该水华及其毒素的神经毒性。

2. 毕业设计(论文)主要任务及要求

水华束丝藻(Aphanizomenon flos-aquae) 是一种在世界性的富营养化水体中快速繁殖的丝状蓝藻。由于水华束丝藻能分泌束丝藻毒素(aphantoxins)或麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisons (PSPs)),该毒素是一种毒性极强的神经毒素,对人体健康和环境安全将产生严重的影响。虽然麻痹性贝类毒素能影响细胞的电位门控钠离子通道而发挥它的毒性,且已经证明对鱼类的运动与游泳行为、脑功能及肝脏的功能产生影响,然而束丝藻毒素对骨骼肌糖代谢的生理生化水平的致毒效应和致毒机制仍然需要理解,截至目前,在这一方面的研究尚未见报道,为此本文乃选此题进行研究。

本文以滇池水华期间(2009)采集分离的水华束丝藻为材料,藻株经实验室鉴定、分离、纯化、培养、细胞内毒素抽提和纯化,毒素含量和成分分析后,通过腹腔注射(5.3 and 7.61mg STXeq/kgbw作为低浓度和高浓度)对斑马鱼进行毒素处理,在染毒后的24小时内的不同时间点(0,1,3,6,9,12 和 24h)取斑马鱼骨骼肌组织,利用生物化学和生理学方法,如紫外分光光度法、酶联免疫吸附沉淀法(ELISA)以及分子生物学方法对其糖原合成酶(glycogen synthase)、葡萄糖激酶(glucokinase)、己糖激酶(Hexokinase ,HK)、糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase,GP)、葡萄糖磷酸变位酶(phosphoglucomutase,PGM)、葡萄-6磷酸酶(G-6-Pase)、皮质醇(Cortisol)、酪氨酸氨基转氨酶(tyrosine aminotransferase,TAT)、丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvatecarboxykinase,PEPCK)、果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)(紫外分光光度法,ELISA)、磷酸果糖激酶(phosphor-fructokinase,PFK)进行研究,旨在揭示斑马鱼骨骼肌组织糖水平变化对束丝藻毒素的响应,为水产养殖、野生动物保护及人类健康提供新的参考依据。

3. 毕业设计(论文)完成任务的计划与安排

本学期及下学期,布置任务,进行大量的准备工作(同学们按照周写,比如第一周,第2周,。。。。),包括如下内容:

(1)资料查找,筛选,阅读,讨论和立论;

(2)研究思路和研究方法的设计、筛选和选择(根据自身能力和实验室条件确定)和细化,讨论和方案定稿(包括设备,药品等);

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4. 主要参考文献

[1]孙敏敏,刘含亮,王红卫,等. 酵母铬对尼罗罗非鱼生长和糖代谢的影响. 动物营养学报,2013,25(9):2143-2149.

[2] 张颂, 蒋明,文华, 等. 饲料碳、脂比例对胭脂鱼幼鱼生长及糖代谢的影响. 华南农业大学学报,2014,35(3):1-7.

[3] 戴宇飞,龚凤英* ,朱惠娟,等. 西布曲明对肥胖小鼠葡萄糖代谢的影响.中国卫生检验杂志,2012,22(5):1023-1028.

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