海藻多糖降解酶系的筛选与挖掘任务书

 2022-01-28 09:01

全文总字数:5230字

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

褐藻胶寡糖除具有溶解性强、稳定性高及安全无毒等理化特性,还具有抗病毒和抑菌活性等生理活性,广泛用于医药和特定保健品等领域。

制备褐藻胶寡糖的重要途经是化学降解或酶解天然多糖,但是大部分产酶微生物生长条件特殊、产酶量低,分离困难。

随着基因工程的发展,用pET28a系统在大肠杆菌中高效表达褐藻胶裂解酶的基因片段,对重组蛋白进行酶活分析,并对表达体系进行初步优化,对重组酶进行酶学性质研究。

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2. 实验内容和要求

本课题主要是研究高合成活性青霉素酰化酶突变子的筛选,对酶法合成β-内酰胺类抗生素具有重要意义。

解决的问题:1. 克隆表达褐藻胶裂解酶基因。

对工程菌的诱导表达条件进行优化,包括诱导温度及诱导时间、诱导剂浓度。

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3. 参考文献

[1]Zhi-Peng Wang,Min Cao,Bing Li,Xiao-Feng Ji,Xin-Yue Zhang,Yue-Qi Zhang,Hai-Ying Wang. Cloning, Secretory Expression and Characterization of a Unique pH-Stable and Cold-Adapted Alginate Lyase[J]. Marine Drugs,2020,18(4).

[2]Zeng Jie,An Ding,Jiao Chao,Xiao Qiong,Weng Huifen,Yang Qiuming,Xiao Anfeng. Cloning, expression, and characterization of a new pH‐ and heat‐stable alginate lyase from Pseudoalteromonas carrageenovora ASY5[J]. Journal of Food Biochemistry,2019,43(7).

[3]Pei Xiaojie,Chang Yaoguang,Shen Jingjing. Cloning, expression and characterization of an endo-acting bifunctional alginate lyase of marine bacterium Wenyingzhuangia fucanilytica.[J]. Protein expression and purification,2019,154.

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4. 毕业设计(论文)计划

起讫日期 设计(论文)各阶段工作内容 备 注2017.12~2018.1 查阅、收集文献资料 2018.3~2018.3 理论学习及总体方案规划 2018.3~2018.4 褐藻胶裂解酶蛋白的诱导表达 2018.4~2018.4 褐藻胶裂解酶蛋白的诱导表达条件优化及蛋白纯化 2018.4~2018.5 褐藻胶裂解酶的酶学性质研究 2018.5~2018.5 论文撰写

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