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1. 毕业设计（论文）的内容和要求
（1）论文内容采用基因工程手段，构建质粒pRSFDuet-lacs，并导入大肠杆菌。
以大肠杆菌为宿主诱导表达产酶，并对lacs进行纯化。
研究嗜热酶lacs催化甜菊糖生成甜菊醇的催化条件。
2. 实验内容和要求
实验内容：采用基因工程手段，以大肠杆菌作为宿主菌，对lacs进行高效表达，并对重组酶进行纯化。
研究嗜热酶lacs催化甜菊糖生成甜菊醇的催化条件。
实验要求：熟悉掌握基因克隆表达的思路、方法及流程，构建糖基转移酶的重组质粒；明确实验目标，熟悉相关实验仪器的使用，掌握基本实验操作，以大肠杆菌为宿主并诱导产酶，运用蛋白纯化技术获得纯酶。
3. 参考文献
[1] J.A. Ko, Y.B. Ryu, H.J. Kwon, H.J. Jeong, S.J. Park, C.Y. Kim, Y.J. Wee, D. Kim, W.S.Lee, Y.M. Kim, Characterization of a novel steviol-producing beta-glucosidasefrom Penicillium decumbens and optimal production of the steviol, Appl.Microbiol. Biotechnol. 97 (2013) 81518161.
[2] A.G. Renwick, S.M. Tarka, Microbial hydrolysis of steviol glycosides, FoodChem. Toxicol. 46 (Suppl. 7) (2008) S7074.
[3] J.M. Chen, Y.M. Xia, H.D. Wan, H.J. Wang, X. Liu, A complete specific cleavageof glucosyl and ester linkages of stevioside for preparing steviol with abeta-galactosidase from Sulfolobus solfataricus, J. Mol. Catal. B Enzym. 105(2014) 126131..
4. 毕业设计（论文）计划
第1-2周：查阅文献，熟悉课题有关背景，合理设计实验方案.第3-4周：熟悉实验原理和相关操作。
第5-6周：嗜热酶lacs的异源表达。
第7-8周：制备粗酶液，研究催化条件。
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