CRISPR/Cas9技术敲除酿酒酵母Prm1基因任务书

 2022-01-26 10:01

全文总字数:867字

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

细胞融合研究最深入的模型之一是酿酒酵母的交配细胞融合。

在交配过程中,Prm1是高度受信息素诱导表达的膜蛋白,定位于融合位点。

本研究利用CRISPR/Cas9技术构建Prm1酿酒酵母缺陷株,为Prm1在细胞融合中作用机制的研究奠定基础。

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2. 实验内容和要求

1. 掌握酵母培养及其转化的操作过程;2. 设计针对Prm1基因的酿酒酵母sgRNA;3. 构建含sgRNA的CRISPR质粒;4. 转化酵母;5. 挑阳性质粒菌落PCR验证后做基因组PCR验证。

3. 参考文献

1. Olmo VN, Grote E. Prm1 functions as a disulfide-linked complex in yeast mating. J Biol Chem. 2010 Jan 22;285(4):2274-83. doi: 10.1074/jbc.M109.068874. Epub 2009 Nov 20. PMID: 19933274; PMCID: PMC2807284.2. Olmo VN, Grote E. Prm1 targeting to contact sites enhances fusion during mating in Saccharomyces cerevisiae. Eukaryot Cell. 2010 Oct;9(10):1538-48. doi: 10.1128/EC.00116-10. Epub 2010 Aug 20. PMID: 20729291; PMCID: PMC2950424.

4. 毕业设计(论文)计划

2021.01-2021.02 文献阅读,并完成开题报告2021.02-2021.03 完成毕业论文的第一章综述。

2021.03-2021.05 实验2021.05-2021.06 撰写论文

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