脱氧雪腐镰刀菌烯醇降解酶异源表达体系的构建任务书

 2022-01-26 09:01

全文总字数:3587字

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

1.文献查阅掌握文献检索方法,利用南京工业大学图书馆数据库、中国知网、维普数据库、万方数据、Elsevier电子期刊、SCI数据库等途径检索查阅与大肠杆菌表达外源基因以及单加氧酶BVMOs相关的文献。

2.文献阅读及综述阅读与课题相关的外文与中文文献,了解国内外的研究动态,撰写文献综述。

3.明确实验任务,拟定实验方案根据所查阅文献的内容,确定实验内容及方案,拟定科学可行的研究计划。

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2. 实验内容和要求

本课题以挖掘微生物降解ZEN毒素的功能基因为目的,拟构建葡萄糖脱氢酶基因的异源表达体系。

优化其诱导条件以提高其表达产物产量及可溶性,最以DON为底物验证其功能。

需解决的问题:1. 葡萄糖脱氢酶基因基因在BL21中高效表达的最适条件的确定;2.如何提高表达产物的可溶性;3.表达产物的功能性如何; 4.表达产物降解DON的最适条件的探索。

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3. 参考文献

[1] E. Streit, G. Schatzmayr, P. Tassis, E. Tzika, D. Marin, I. Taranu, C. Tabuc, A. Nicolau, I. Aprodu and O. Puel. Current situation of mycotoxin contamination and co-occurrence in animal feed-Focus on Europe. Toxins, 2012, 4 (10): 788-809

[2] P. Pinton, J.-P. Nougayrde, J.-C. Del Rio, C. Moreno, D.E. Marin, L. Ferrier, A.-P. Bracarense, M. Kolf-Clauw and I.P. Oswald. The food contaminant deoxynivalenol, decreases intestinal barrier permeability and reduces claudin expression. Toxicol. Appl. Pharm., 2009, 237 (1): 41-48

[3] P. Pinton, D. Tsybulskyy, J. Lucioli, J. Laffitte, P. Callu, F. Lyazhri, F. Grosjean, A.P. Bracarense, M. Kolf-Clauw and I.P. Oswald. Toxicity of deoxynivalenol and its acetylated derivatives on the intestine: differential effects on morphology, barrier function, tight junction proteins, and mitogen-activated protein kinases. Toxicol. Sci., 2012, 130 (1): 180-190

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4. 毕业设计(论文)计划

2020.12-2021.2 文献查阅,完成开题报告,熟悉实验仪器;2021.3-2021.4 载体的构建以及诱导表达;2021.4-2021.5 优化条件,提高产物的可溶性表达;2021.5-2021.6 目标产物的功能性验证

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