多菌灵水解酶基因mheII的克隆及其在大肠杆菌中的异源表达任务书

 2023-05-21 04:05

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

1.克隆获得多菌灵水解酶基因mheII。

2.构建重组表达载体pET29a-mheII。

3.重组表达载体转化大肠杆菌BL21菌株,诱导水解酶表达。

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2. 实验内容和要求

1.查阅文献,获得相似基因序列,并以此设计引物。以菌株的基因组为模板,PCR扩增。

2.比对PCR产物与已知相似基因序列的同源性,初步推断水解酶基因mheII的序列。

3.PCR产物TA克隆,并制备大肠杆菌感受态细胞。

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3. 参考文献

[1]田连生,陈菲.多菌灵降解菌T8-2的分离及其降解条件研究[J].江苏农业科学,2008,6:271-274

[2]ZhichunWang,YangyangWang,FenfenGong,JuanZhang,QingHong,ShunpengLi.BiodegradationofcarbendazimbyanovelactinobacteriumRhodococcusjialingiaedjl-6-2[J].Chemosphere81(2010)639644

[3]ZhangGuishan,JiaXiaoming,ChengTianfan,eta1.IsolationandcharacterizationofanewcarbendazimdegradingRalstoniasp.Strain[J].worldJournalofMicrobiologyandBiotechnology,2005,21(3):265-269

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4. 毕业设计(论文)计划

2022.3.1-2022.3.10:获得相似基因序列,并以此获得引物。

2022.3.11-2022.3.25:PCR扩增,并通过比对PCR产物与已知相似基因序列的同源性,初步推断水解酶基因mheII的序列。

2022.3.26-2022.4.20:PCR产物TA克隆,制备感受态大肠杆菌细胞,水解酶基因表达载体pET-29a-mheII的构建。

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